Las plantas aprovechan solo una parte de la energía luminosa absorbida para realizar la fotosíntesis. El exceso de energía se puede disipar como calor o bien se puede reemitir en forma de fluorescencia. Estos tres procesos están en competencia, de modo que el aumento de uno supone el descenso en los otros. Generalmente, la fluorescencia emitida por la clorofila supone entre 1% – 3% de la luz total absorbida (Maxwell y Johnson 2000).
Cualquier cosa que afecte a la fotosíntesis afectará a la emisión de fluorescencia de la clorofila. Por lo que, la fluorescencia de la clorofila es una herramienta para evaluar el estado fotosintético, detectar cambios fisiológicos y ambientales de las plantas, y estimar el estrés vegetal.
La medida de la fluorescencia de la clorofila es técnica habitual en fisiología vegetal, ya que proporciona información sobre el estado del fotosistema II en escenarios muy diversos.
Con aplicaciones en: detección de situaciones de estrés, respuestas de las plantas a los cambios ambientales, parámetros de crecimiento y desarrollo, la variación genética y la diversidad ecológica …
Son medidas rápidas no destructivas que informan de los cambios producidos a nivel de hoja.
Hay un gran abanico de posibilidades, entendidas como técnicas y parámetros medidos. Hay diferencias en el tipo de instrumentación, la forma de alcanzar el período de adaptación a la oscuridad, y las condiciones ambientales en que se hacen las medidas.
Los parámetros más habituales son:
Máxima eficiencia del fotosistema II o índice Fv/Fm
Fv/Fm = (Fm – Fo)/Fm = (Y II / qP)
Eficiencia del fotosistema II (Y II) como rendimiento cuántico en adaptación a la luz
Y II = (Fm´ – Fs)/Fm´
Apagado fotoquímico (qP)
qP = (Fm´ – Fs)/(Fm´ – Fo´)
Apagado no fotoquímico (NPQ)
NPQ = (Fm – Fm´)/Fm´ = (Fm/Fm´) – 1
El fluorómetro OS5p+ es el equipo más completo para medir la fluorescencia de la clorofila de ADC. OS5p+ determina parámetros de adaptación tanto a la luz ambiental como a la oscuridad, como Fo, Fm, Fv/Fm, Fv/Fo, Y(II), Ft, Foq y Fms. También calcula los coeficientes de extinción fotoquímicos y no fotoquímicos qP, qN y NPQ. Permite controlar la intensidad de la fuente de luz y la intensidad del pulso de saturación. Se incluye una luz moduladora de dos canales (660 nm / 450 nm), así como un LED de 735 nm para determinaciones Fod.
También incluye una pinza de medida con sensor de radiación PAR y de temperatura de la hoja integrados. El rendimiento Y(II) varía no sólo con el estrés, sino también con la luz ambiental y los niveles de temperatura de la hoja, por lo que es importante monitorizarlos durante todo el experimento.
Pesa 1,4 kg y tiene 12 horas de autonomía en uso continuo.
El OS1p permite realizar una amplia variedad de pruebas de estrés en plantas. Estas pruebas incluyen experimentos adaptados tanto a la luz ambiental como a la oscuridad, como la medida del índice Fv/Fm, coeficientes de extinción, curvas rápidas. OS1p es muy similar a OS5p+, la diferencia está en que OS1p tiene una luz actínica blanca mientras que OS5p+ tiene una luz actínica RGBW.
El Fluorómetro OS30p+ para la detección rápida del estrés proporciona valores del protocolo FV/FM y del protocolo Strasser OJIP. Se obtiene la eficiencia fotoquímica máxima y con la curva de inducción de fluorescencia OJIP se comprueba el estrés en un estado de adaptación a la oscuridad. Los parámetros obtenidos son: Fo, Fm, Fv/Fm, Fv/Fo, O, K, J, I, P, tFm, A, Mo y PI/ABS.
En este equipo la unidad de análisis y la consola están integradas, por lo que es posible hacer medidas con una sola mano. El peso del medidor es de 900g.
El Plant Stress Kit de ADC Bioscientific incorpora dos fluorómetros: Y (II) y. Es decir, combina el método PAM con la técnica de excitación continua.
Y (II) mide la eficiencia del Fotosistema II (PSII) como rendimiento cuántico en adaptación a la luz. Y también proporciona valores de tasa de transporte de electrones ETR, la radiación PAR, Temperatura de la hoja, Máxima fluorescencia en estado estacionario FMS (o FM’).
Con el fluorómetro Fv / Fm se obtienen medidas adaptadas a la oscuridad de Fo, Fm, Fv, Fv / Fm.
Los Fluorómetro OS5p+ y OS1 p se pueden incorporar, con la ayuda de un adaptador, a lo medidor de fotosíntesis modelo LCPro con cámaras Broad o Narrow.
